Sheep Genomic DNA, Female(绵羊基因组DNA（雌性）)

规格：100ug

品牌：Zyagen

产品编号：GS-190F

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产品详情

Sheep Genomic DNA, Female(绵羊基因组DNA（雌性）)

货号:GS-190F

品名:Sheep Genomic DNA, Female(绵羊基因组DNA（雌性））

品牌:zyagen

规格:100ug

价格:请询价

货期:现货

关键词:

绵羊基因组DNA、雌性、100ug、Zyagen、PCR扩增、Southern印迹、基因组文库构建、SNP分析、甲基化研究、基因表达分析、高纯度DNA、无RNA污染、分子生物学试剂、绵羊遗传学研究、基因分型、DNA测序、限制性内切酶、动物基因组、科研试剂、基因克隆

产品详情介绍

产品描述

货号：GS-190F

英文名：Sheep Genomic DNA, Female

中文名：绵羊基因组DNA（雌性）

品牌：Zyagen

规格：100 µg

纯度：A260/A280比值>1.8，经琼脂糖凝胶电泳验证无降解，β-actin PCR扩增成功，EcoR I和Hind III酶切验证完整。

应用领域：PCR扩增、Southern印迹、基因组文库构建、SNP分析、甲基化研究、基因表达分析等。

产品特点

1. 高纯度与完整性

• 采用Nanodop分光光度计精确测定浓度，确保无蛋白质、多糖或RNA污染。

• 通过琼脂糖凝胶电泳检测，DNA分子量完整（>10 kb），无降解片段。

2. 严格质量控制

• 每批次进行β-actin PCR扩增验证，确保无抑制剂残留。

• 经EcoR I和Hind III双酶切验证，DNA可完全消化，无酶切位点突变。

3. 适用性广泛

• 支持常规PCR、实时荧光定量PCR（qPCR）、限制性内切酶消化、测序文库构建等实验。

• 适用于哺乳动物基因组研究，尤其针对绵羊遗传学分析。

4. 便捷性

• 预溶于TE缓冲液，开瓶即用，减少实验前处理步骤。

储存条件

• 短期储存：-20℃（建议分装保存，避免反复冻融）。

• 长期储存：-80℃（可稳定保存1年）。

• 运输条件：全程干冰运输，确保低温稳定性。

工作原理

Zyagen绵羊基因组DNA的提取基于酚-氯仿抽提法结合乙醇沉淀，结合无DNase的RNase处理，确保RNA污染<0.1%。提取后的DNA通过超滤柱纯化，去除小分子杂质，最终获得高纯度、高分子量的基因组DNA。质量控制流程包括紫外分光光度法（A260/A280检测）和琼脂糖凝胶电泳分析，确保产品符合国际标准。

解决实验中的关键问题

1. PCR扩增失败

• 问题：模板DNA降解或污染导致扩增效率低。

• 解决方案：使用本产品（A260/A280>1.8），避免样本反复冻融；若污染存在，可重新纯化或增加PCR循环数。

2. Southern印迹信号弱

• 问题：DNA片段大小不足或酶切不完全。

• 解决方案：选择EcoR I或Hind III进行预消化验证，确保DNA完整性。

3. SNP分型准确性低

• 问题：模板DNA纯度不足干扰探针结合。

• 解决方案：本产品经严格纯化，可直接用于SNP分型试剂盒。

4. 甲基化分析偏差

• 问题：DNA中残留RNA干扰亚硫酸盐处理。

• 解决方案：使用本产品（RNA污染<0.1%），确保甲基化位点检测可靠性。

使用方法

1. 解冻与稀释

• 从-20℃取出后，4℃解冻，轻轻混匀。

• 按实验需求稀释至工作浓度（通常为50-100 ng/µl）。

2. PCR扩增

• 推荐体系（以20 µl体系为例）：

◦ 模板DNA：1-2 µl（50-100 ng）

◦ 引物：0.5 µM（正向/反向各1条）

◦ dNTPs：0.2 mM

◦ Taq DNA聚合酶：1 U

◦ 10×缓冲液：2 µl

◦ 补ddH2O至20 µl

• 循环条件：95℃预变性5分钟；95℃变性30秒，55-65℃退火30秒，72℃延伸1分钟（循环35次）；72℃终延伸10分钟。

3. Southern印迹

• 酶切：取5 µg DNA用EcoR I/Hind III双酶切，37℃孵育2小时。

• 电泳：1%琼脂糖凝胶，100 V电泳1小时。

• 转膜：使用毛细管法转膜至尼龙膜，12小时。

• 探针杂交：按试剂盒说明书操作，X光片曝光后显影。

常见问题与解决方案

1. Q：DNA浓度低于标称值？

• 原因：运输或储存不当导致部分降解。

• 解决：联系技术支持申请补发；实验时增加上样量。

2. Q：PCR出现非特异性条带？

• 原因：模板DNA中残留RNA或抑制剂。

• 解决：增加RNase A处理步骤。

3. Q：Southern印迹背景过高？

• 原因：DNA酶切不完全或膜未充分封闭。

• 解决：延长酶切时间至4小时；增加封闭时间至1小时。

4. Q：甲基化分析结果不稳定？

• 原因：DNA中残留蛋白质干扰亚硫酸盐转化。

• 解决：纯化后使用蛋白酶K处理（55℃孵育1小时）。

免责声明

1. 本产品为科研用途，不可用于临床诊断或治疗。

2. 使用前需根据实验需求优化条件，Zyagen不承担因操作不当导致的实验失败责任。

3. 产品储存条件需严格遵循说明书，超期储存可能影响性能。

4. 本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，仅个人观点，具体以品牌信息文档为准。

关键词：绵羊基因组DNA、雌性、100ug、Zyagen、PCR扩增、Southern印迹、基因组文库构建、SNP分析、甲基化研究、基因表达分析、高纯度DNA、无RNA污染、分子生物学试剂、绵羊遗传学研究、基因分型、DNA测序、限制性内切酶、动物基因组、科研试剂、基因克隆

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